蛋白質質譜鑒定
(1)技術原理
單一蛋白的質譜鑒定:用蛋白酶將蛋白質消化成肽段混合物,經MAILDI或ESI等軟電離手段將其離子化,然后通過質量分析器將具有特定質核比的肽段離子分離開來。通過實際譜圖和理論上蛋白質經過蛋白酶消化后產生的一級質譜峰圖和二級質譜峰圖進行的比對,進行蛋白鑒定。
混合蛋白樣品的質譜鑒定:混合蛋白樣品的質譜鑒定的方法被稱為“鳥槍法”或者多維蛋白質鑒定技術(Mud PIT)。現將蛋白溶液或SDS-PAGE條帶酶切成肽段混合物,再用高效液相色譜將其分離成簡單組分,最后依次導入高分辨率質譜儀中進行質量分析。
(2)技術應用
蛋白質表達譜和混合蛋白質的鑒定;相互作用蛋白質的鑒定;稀有物種的蛋白質組鑒定。
【服務內容】
蛋白質樣本制備(客戶可提供一制備好的樣本,如蛋白溶液或SDS-PAGE條帶),包括蛋白質的分離、純化、酶切;蛋白質酶切、液相分離、質譜鑒定和數據庫檢索。
【客戶須知及標本要求】
(1)客戶須明確檢測目的和具體要求,最好能提供1~2篇文獻或資料。
(2)樣品來源:考染蛋白質全部接受;銀染的蛋白質不得使用戊二醛作為固定劑;蛋白質干粉;蛋白質溶液等。
(3)寄送要求:蛋白質條帶可用冰袋包裝寄送,蛋白質溶液用干冰或液氮寄送。